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关于PCR检测仪的PCR反应三大主要步骤分析

           PCR检测仪是利用升温使DNA变性,用控制性内切酶使DNA双链解链,在聚合酶的作用下使单链变成双链,进而起到基因复制的目的。PCR的反应包括三个主要步骤;
         分别是Denaturation ,Annealing of primers,Extension of primers。 所谓 Denaturing乃是将DNA加热(至90~95℃)变性, 将双股的DNA加热后转为单股DNA以做为复制的模板。 而Annealing 则是令 Primers于一些的温度下(冷却至55~60℃)附着于模板DNA两端。 后在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase 的作用下(加热至70~75℃)进行引物的延长 Extension of primers及另一股的合成。
           PCR的早设想核酸研究已有100多年的历史,本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技能,Korana于1971年早提出核酸体外扩增的设想:“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。
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